三种消毒剂检测方法分析对比

　　三种 消毒剂检测方法分析对比
　　对三种消毒剂检测方法戊二醛溶液，二氯异氰尿酸钠溶液系灭枯草杆菌黑色变种芽孢的效果进行了比较。结果， 用欧洲标准悬液定量杀菌试验． 改良欧洲悬液定量杀菌试验和载体浸泡定量杀菌试验检测含戊二醛2％ (g／m1)溶液杀灭枯草杆菌黑色变种芽化达消毒合格标准， 作用时间分别为2.5．3.0，2.0 h。用前两方法检测含有效氯4 500 mg／L的二氯异氰尿酸钠溶液及用载体方法检测含有效氯l 000 mg／L该液杀灭枯草杆菌黑色变种芽孢达消毒合格标准，作用时间分别为30，20．10 min。当染菌片的芽孢悬液中增含小牛血清50%(ml／m1)时， 用载体方法检测含有效氯5 000 mg／L的二氯异氰尿酸钠溶液杀灭该芽孢达消毒合格标准，作用时间近20 min， 与用欧洲标准悬液法检测者（30 min)相近 表明三种方法检测受有机物影响较小的戊二醛杀菌效果相差较小，检测受有机物影响较大的二氯异氰尿酸钠杀菌效果相差较大。后者可能与方法中含有机物多少有关。
　　消毒剂检测方法
　　1、消毒剂检测菌悬液与菌片的制备
　　在欧洲标准悬液法和改良欧洲悬液法中， 用含胰蛋白胨0，1％ (g／m1) 和氯化钠0，85％ (g／m1) 的去离子水溶液(pH6 8～7 0)， 将枯草杆菌黑色变种(ATCC9372）芽孢稀释至规定含菌量的悬液。在载体法中， 用含蛋白胨0．1％ (g／m1)的磷酸盐缓冲液(PBS， pH 7．2～7，4)制成的枯草杆菌黑色变种芽孢悬液滴染1，0 cm×1，0 cm 布片， 制成菌片。
　　2、 消毒剂检测中和剂选择试验
　　因悬液法中和剂选择试验结果可适用于载体试验中， 故试验用欧洲标准悬液法进行。试验设6组， 第l组到第5组， 皆将0．5 ml含牛血清白蛋白(SIGMA公司产) 3％ (g／m1) 的去离子水溶液(过滤除菌后使用) 加入无菌试管中， 再加0，5 ml枯草杆菌黑色变种芽孢悬液， 混匀。然后， 第l、2组均加入4．0 ml消毒剂溶液(用标准硬水配制)， 作用至预定时间， 第l组吸取0，5 ml加到含有4．5 ml PBS的试管中， 第2组吸取0，5 ml加到含有4 5 ml中和剂溶液的试管中； 第3组加入4．0 ml中和剂溶液， 作用 预定时间， 吸取0、5 ml加到含有4，5 ml中和剂溶液的试管中； 第4组加入4．0 ml中和产物(1份消毒剂溶液加4份中和剂溶液， 中和作用l0 min) 溶液，作用至预定时间， 吸取0．5 ml加到含有4．5ml中和产物溶液的试管中： 第5组加入4．0ml PBS， 作用至预定时间， 吸取0．5 ml加到含有4．5 ml PBS的试管中。第6组为中和剂溶液、中和产物溶液和胰蛋白胨大豆蛋白胨培养基(TSA)阴性对照。试验结果，以第l组不长菌或长菌量远低于第2组， 第2组长菌量不低于l00 cfu／ml， 第3、4、5组长菌量达5．0×l0 ～5．0×l0。cfu／ml且组间菌数相差不超过l0％ ， 第6组不长菌， 为所选中和剂合适。
　　3、 消毒剂检测定量杀菌试验
　　欧洲标准悬液定量杀菌试验 向试管内加入0．5 ml含牛血清白蛋白3％(g／m1) 的去离子水溶液和0．5 ml枯草杆菌黑色变种芽孢悬液， 混匀， 再加入4．0 ml消毒剂溶液(阳性对照组为无菌蒸馏水)，混匀并立即记时。作用至规定时间， 取0．5ml混悬液， 加于4．5 ml中和剂溶液中， 混匀。中和作用l0 min， 取0．5 ml该液或其稀释液接种无菌平皿， 一式两份。倾注l8～ 20 ml TSA 培养基， 混匀。置(37±1)℃培养72 h， 计数菌落数， 计算杀灭率。